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帶正電荷的 Nanogold®簡(jiǎn)介

更新時(shí)間:2023-10-08      點(diǎn)擊次數(shù):822

帶正電荷的 Nanogold®可以參與許多不同的標(biāo)記反應(yīng)。

如果您想要綴合的分子具有羧酸基團(tuán)(例如肽中的C端),您可以使用肽合成中使用的反應(yīng)將其與帶正電荷的納米金綴合:使用EDC 1-乙基)激活羧酸-3-[3-二甲基氨基丙基]碳二亞胺鹽酸鹽)和磺基-NHS;您可以從多種來(lái)源購(gòu)買 EDC。 EDC 與待標(biāo)記分子上的羧基反應(yīng),形成胺反應(yīng)性 O-酰基異脲中間體。該中間體容易水解,使其在水溶液中的壽命較短。添加磺基-NHS (5 mM) 通過(guò)將胺反應(yīng)性中間體轉(zhuǎn)化為胺反應(yīng)性基 -NHS 酯來(lái)穩(wěn)定胺反應(yīng)性中間體,從而提高 EDC 介導(dǎo)的偶聯(lián)反應(yīng)的效率。這種活化的磺基-NHS 酯隨后很容易與氨基反應(yīng)。

或者,帶正電的 Nanogold® 上的氨基可以使用交聯(lián)劑激活。顯示了兩個(gè)示例。首先,使用水溶性同雙功能交聯(lián)劑雙(磺基-琥珀酰亞胺基)辛二酸酯(BS3) 來(lái)綴合肽的N端,其中C端已被保護(hù)。該過(guò)程的一個(gè)特點(diǎn)是它提供了相對(duì)較長(zhǎng)的鏈接:BS3 的 C8 鏈被添加到帶有胺的丙基上,該胺突出到 Nanogold® 顆粒配體殼的外表面之外。在第二個(gè)方案中,水溶性異雙功能交聯(lián)劑,磺基-琥珀酰亞胺基 4-[ N-馬來(lái)酰亞胺基-甲基]-環(huán)己烷-1-羧酸酯 ( Sulfo -SMCC),用于將胺與馬來(lái)酰亞胺基團(tuán)選擇性地與硫醇反應(yīng)。然后使用馬來(lái)酰亞胺衍生物來(lái)標(biāo)記硫醇化生物分子,例如含有半胱氨酸的肽。多種其他交聯(lián)劑可用于將胺連接至不同的官能團(tuán);

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